นอกจากการเกิด DNA methylation

 แล้ว ยังมีการใส่หมู่ methyl กับโปรตีน histone ตำแหน่งที่สำคัญ ได้แก่ histone H3 lysine9 (H3K9)6 ซึ่งควบคุมการแสดงออกของยีนด้วย DNA methylation ที่ตำแหน่ง promoter ที่เป็น เป้าหมายนั้นมีความสำคัญมากในการควบคุมการเจริญเติบโตโดย เฉพาะเซลล์เม็ดเลือด โดยจะถูกควบคุมผ่านทาง growth factor, cytokine และโมเลกุลอื่นๆ ในโรคมะเร็งพบว่ามีการเปลี่ยนแปลงของ DNA methylation แบบซับซ้อน โดยรวมแล้วจะเป็นลักษณะของการเกิด methylation โดยรวมพร้อมๆกันทุกตำแหน่ง  เจเนติกส์ พบการการเพิ่มขึ้นของ DNMTs และ การเกิด methylation ในตำแหน่ง CpG ที่ไม่มีการ methylation มาก่อน   Methylation-specific PCR  Methylation-specific PCR เป็นเทคนิค PCR ที่ใช้ตรวจหาความผิดปกติหรือโรคที่มี methylation บนสายดีเอ็นเอแตกต่างกัน หลักการของการทำ methylation-specific PCR ใช้การปรับเปลี่ยนโครงสร้างดีเอ็นเอในเบส C (cytosine) ที่มี 2 แบบ คือ แบบที่มีการเติมหมู่เมธิล (methylation) และแบบที่ไม่มีการเติมหมู่เมธิล โดยการทำเริ่มต้นด้วยขั้นตอน Bisulfite modification ซึ่งในขั้นตอนนี้เบส C ที่ไม่มีการเติมหมูเมธิลจะถูกเปลี่ยนโครงสร้างโดย bisulfite ไปเป็นเบส U (uracil) แต่ถ้าเบส C นั้นมีการเติมหมู่เมธิลอยู่จะไม่ถูกเปลี่ยนเป็นเบส U หลังจากการทำ Bisulfite modification จะทำให้ดีเอ็นเอที่ได้มีลำดับนิวคลีโอไทด์ที่แตกต่างกันไปขึ้นกับสายดีเอ็นเอที่มี methylation ที่ต่างกัน แล้วนำมาออกแบบไพรเมอร์ให้มีความจำเพาะและมีขนาดที่ต่างกันสำหรับการทำปฏิกิริยา PCR

โพสต์โดย : midnight เมื่อ 3 พ.ค. 2566 18:11:30 น. อ่าน 99 ตอบ 0